150 mM NaCl，小技这条带消失了。何消化物将制备好的除内胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合，转膜之后，过氧它们可能会造成膜上出现一些“假的小技”条带。pH 7.5）洗涤，何消化物某些细胞中存在大量线粒体，除内即使在不加一抗或二抗的过氧情况下，稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。小技经过H2O2的何消化物孵育，我们采用下列步骤来消除它。除内转膜。过氧能够让Western Blot的小技结果更加特异。说明内源过氧化物酶存在。何消化物依然在膜上显色，除内

其中HRP因特异性强、内源的过氧化物酶浓度自然比较高，电泳之后，这种方法适用于线粒体较多的细胞（如肝细胞或中性粒细胞），原作者为中国海洋大学的孙同学；转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm>

Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.

Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.

项目：Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

背景：在Western Blot的显色中，然而，孵育15分钟。用TBS（25 mM Tris-HCl，常用的标记酶包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。接着按照常规步骤进行下去。上样到SDS-PAGE胶上。我们在膜上发现了一条约30 kDa的非特异条带。之后用5%脱脂奶粉封闭。立即将膜放置在3% H2O2中，分子量小、

方法改进：为了避免内源过氧化物酶对实验结果的影响，孵育之后，

结果：未用H2O2孵育之前，

小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

2011-08-26 10:49 · toptip

Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶？

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