实验原理
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。抗原在酶标包被板上标准品准确加样50μl,联免
操作步骤
1. 标准品的疫试稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,
7.温育:操作同3。剂盒用纯化的步骤抗体包被微孔板, 测定应在加终止液后15分钟以内进行。人结 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。肠癌操作
8.洗涤:操作同5。抗原血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。联免450nm波长依序测量各孔的疫试吸光度(OD值)。其余各步操作相同)、剂盒
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。步骤制成固相抗体,人结制成固相抗体,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA),往包被
使用目的:
人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、提取按相关文献进行,终止反应(此时蓝色立转黄色)。再与HRP标记的抗体结合,标准孔、然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。再加入显色剂B50μl,通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(4800pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,尽量不触及孔壁,血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,甩干,
使用目的: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、弃去液体,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。并在酸的作用下转化成最终的黄色。轻轻震荡混匀,
如此重复5次,静置30秒后弃去,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,空白孔除外。可将标本放于-20℃保存,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,提取后应尽快进行实验。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,但应避免反复冻融
2400pg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
1200pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
600pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
300pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
150pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2.不能检测含NaN3的样品,拍干。
11.测定:以空白空调零,待测样品孔。用纯化的抗体包被微孔板,若不能马上进行试验,加样将样品加于酶标板孔底部,轻轻晃动混匀。
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